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特布他林ELISA检测试剂盒
科研试剂编辑:{深圳市恒昊生物科技有限公司}
使用说明书
一、产品简介
特布他林属于β-兴奋剂类药物,可提高胴体瘦肉率,曾被 广泛添加于饲料中。人食用了含特布他林残留的动物性食品, 会出现肌肉震颤、心悸、过敏、头痛目眩、恶心、呕吐、发烧、 颤栗等症状,世界各国已明文禁止其使用。常规仪器检测方法 不能满足实际生产中大批量检测的需求。特布他林快速检测试 剂盒具有方便、快速、灵敏等特点,适用于大批量样品快速检 测。
二、检测原理
本试剂盒采用间接竞争ELISA 法检测尿样和组织等样本中 的特布他林,在微孔条上预包被偶联抗原,利用抗原与抗体的 特异性免疫化学反应的原理来进行,样本中的特布他林和微孔 条上预包被偶联抗原竞争标记有辣根过氧化酶的抗特布他林抗 体,通过洗涤后,用 TMB 底物显色,样品中的特布他林含量 与样品的吸光度值呈反比,与标准曲线比较即可得出特布他林 含量。
展开剩余64%六、溶液的配制
样本前处理需配制:
配液 1 :洗涤工作液:将浓缩洗涤液用去离子水按 1:19 体积比
进行稀释(1份浓缩洗涤液+19 份去离子水)。
七、样本前处理方法
样本处理前须知:
处理任何样本时,都须注意:
(1)实验中必须使用一次性吸头,在吸取不同的试剂时要更 换吸头。
(2)实验之前须检查各种实验器具是否干净,必须使用洁 净实验器具,以避免污染干扰实验结果。
样本前处理步骤:
(A)尿样本的处理方法
1 、 取 50µl 清亮尿样直接测定(如果尿样浑浊一定要过滤或离 心 10min ,4000r/min ,直至得到清亮尿样),暂不用的样 本应冷冻保存。
由于尿液阴性样本可能会产生背景干扰(在某些情况下干 扰数值在标准 2 到 3 之间),所以推荐标准 3 即 0.3ppb 作 为尿液阳性结果的CUT OFF 判断值。
样本稀释倍数:1
(B)组织样本的处理方法一
1 、 称 2±0.05g 组织,加入 6ml 去离子水,充分振荡 2min ,室 温 4000r/min 以上离心 10min 。(注:若组织样本中油脂含 量较高,可在振荡后放入 85℃水浴 10min 后再离心)。
2 、 取 50µl 上清液进行分析。
样本稀释倍数:4
(C) 组织样本(肌肉和肝脏)处理方法二
1 、 称取均匀后的组织样本 2±0.05g ,加入 6ml 乙腈溶液,充 分振荡 2min 。4000r/min 以上,15℃离心 10min;
2 、取上清液 4ml ,在 56℃条件下氮气或空气流吹至完全干燥; 肉样本:
加入 1ml 去离子水混合振荡 30s ,取 50µl 用于分析。
肉样本稀释倍数:1
肝脏样本:
加入 2ml 正己烷振荡溶解,再加入 1ml 去离子水混合振
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